Премахнете методите на tBu за защита на страничната верига Cys

 

Cys(tBu) Обикновено в TFA и I2 са относително стабилни, така че те често се използват за комбиниране за получаване на пептиди с третата двойка дисулфидни връзки и по-горе, без да се нарушават предишните сдвоявания на дисулфидни връзки.
Отстранете tBu Методите обикновено включват метод с живачен ацетат и трихлорометилсилан/дифенил сулфоксид.
Следното е въведение в стъпките на метода с живачен ацетат:

  1. Ще донесе tBu от пептиди, разтворени в лед TFA среда (5-10mg/ml)
  2. Добавете 10 пъти еквивалента на живачен ацетат и разбъркайте в продължение на 3 часа.
  3. Завъртете при понижено налягане, за да се изпари излишната TFA, разтворете в 10% воден разтвор на оцетна киселина
  4. Добавете 20 пъти еквивалента меркаптоетанол и оставете да престои 5 часа
  5. Центрофугирайте за отстраняване на утайката и след това обезсолете или пречистете чрез HPLC.